近期,Plant Cell,Tissue and Organ Culture (PCTOC)在線發表了我所特色果藥選育推廣創新團隊題為“Developing an efficient protocol for hairy root transformation of Corydalis saxicola”的研究論文。我所潘燕林副研究員為該論文第一作者,郭倫發副研究員為論文通訊作者,團隊成員張怡彬、秦洪波和王新桂參與了研究工作。
巖黃連是罌粟科紫堇屬中一種珍稀的多年生草本植物,主要分布于我國西南巖溶地區,是廣西傳統壯瑤藥資源。該植物富含多種生物堿,在肝炎和肝癌治療中發揮重要作用。目前,巖黃連的分子生物學研究剛起步,對其開展生物堿合成途徑、調控機制以及逆境脅迫響應機制等方面研究,篩選功能基因,將為其資源保護和開發利用奠定基礎。然而,其遺傳轉化體系的缺乏嚴重限制了后續的功能基因研究和種質創新進程,不利于該物種的開發利用。
該研究對多種影響巖黃連遺傳轉化效率的因素進行了深入探索,評估其對發根誘導效率和外源報告基因的陽性比例的影響,從中篩選出合適的菌株、根誘導培養基、外植體類型以及適宜的侵染和共培養時間,最終建立起一種基于發根農桿菌介導的巖黃連高效轉基因體系。
該遺傳轉化方法為巖黃連的分子生物學研究,特別是次生代謝物生物合成途徑研究奠定了良好基礎、提供了技術支持,有利于推進巖黃連基于CRISPR/Cas9系統的基因組編輯的發展。
發根農桿菌介導巖黃連毛狀根轉化的表型分析及PCR驗證
發根農桿菌介導的巖黃連遺傳轉化流程
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